1. Liczba płytek krwi jest skorelowana ze wzrostem i agresywnością kilku typów nowotworów, w tym raka wątrobowokomórkowego (HCC ). Wcześniej stwierdziliśmy, że lizaty płytek krwi (hPL) zarówno stymulowały wzrost i migrację komórek HCC, jak i antagonizowały hamujące wzrost i apoptotyczne działanie Regorafenibu, inhibitora wzrostu multikinaz, na linie komórkowe HCC. Oceniliśmy wpływ ludzkiego insulinopodobnego czynnika wzrostu-1 ( IGF1 ), mitogenu zawartego w płytkach krwi, na hamowanie wzrostu, w którym pośredniczy Regorafenib.
2. Do oceny stężeń hPL IGF1 zastosowano zestaw Elisa  . Wpływ  IGF1  na proliferację komórek oceniano testem MTT i analizą progresji cyklu komórkowego. Przeprowadzono testy apoptozy, test zarysowania i test Transwell, aby zmierzyć odpowiednio apoptozę, migrację komórek i inwazję. Western blot przeprowadzono według standardowych protokołów.
3.  Antagonizowane przez IGF1 hamowanie wzrostu wywierane przez Regorafenib na linie komórkowe HCC. Ponadto mitogen blokował apoptozę indukowaną Regorafenibem i zmniejszał szybkość migracji i inwazji komórek. Efekty  IGF1  były z kolei antagonizowane przez działania silnego  inhibitora receptora IGF1  , GSK1838705A, pokazując, że  receptor IGF1  był zaangażowany w mechanizmy  blokowania działania Regorafenibu za pośrednictwem IGF1 . GSK1838705A częściowo zablokował również wpływ hPL na antagonizowanie hamowania wzrostu za pośrednictwem regorafenibu, pokazując, że  IGF1 był ważnym składnikiem działań hPL
4. Wyniki te pokazują, że  IGF1  antagonizował hamowanie wzrostu, migracji i inwazji za pośrednictwem regorafenibu, a także indukcję apoptozy w komórkach HCC za pośrednictwem leku i wzmacniają ideę, że czynniki mikrośrodowiskowe mogą wpływać na działanie leków przeciwnowotworowych.

Okrągły RNA CircHIPK3 promuje proliferację komórek NCI-H1299 i NCI-H2170 poprzez miR-379 i jego docelowy  IGF1

• Udowodniono, że kołowy RNA, posiadający stabilną, kowalencyjnie zamkniętą, ciągłą pętlę, jest rodzajem cząsteczki RNA szeroko rozpowszechnionej u ssaków. Okrągły RNA circHIPK3 ulega obfitej ekspresji w raku wątrobowokomórkowym (HCC) i sprzyja powstawaniu nowotworów. Jednak rola circHIPK3 nie była systematycznie badana w niedrobnokomórkowym raku płuc (NSCLC). W tym badaniu zbadaliśmy, czy circHIPK3 ma wpływ na proliferację komórek w liniach komórkowych NSCLC NCI-H1299 i NCI-H2170 oraz leżące u ich podstaw mechanizmy molekularne.
• Ekspresję circHIPK3 mierzono metodą PCR w czasie rzeczywistym w liniach komórkowych NSCLC. Do wykrycia lokalizacji circHIPK3 w komórkach zastosowano eksperyment z rozdziałem masy jądrowej. Doświadczenia funkcji zysku i straty wykorzystano do zbadania proliferacji komórek NCI-H1299 i NCI-H2170 za pomocą zestawu Cell Counting  Kit -8 (CCK-8) oraz testów tworzenia kolonii. Następnie circHIPK3 wklonowano poniżej genu reporterowego lucyferazy, którego aktywność wykryto w celu sprawdzenia, czy miR-379 może wiązać się z mRNA circHIPK3 lub  IGF1  . Poziom białka  IGF1  wykryto metodą Western blot i  ELISA  w komórkach NCI-H1299 i NCI-H2170 z nadekspresją/knock-down circHIPK3.
• CircHIPK3 generalnie ulegał ekspresji w sześciu rodzajach wykrytych przez nas linii komórkowych NSCLC, a poziom ekspresji był najwyższy w H2170 i najniższy w H1299. Nadekspresja circHIPK3 oczywiście promowała proliferację komórek NCI-H1299, a knockdown circHIPK3 hamował proliferację komórek NCI-H2170. W teście lucyferazy zaobserwowano, że miR-379 sekwestruje mRNA circHIPK3 i  IGF1  z potencjalnymi miejscami wiązania. Ponadto stwierdziliśmy, że nadekspresja circHIPK3 może zwiększać poziomy ekspresji  IGF1  i knockdown go zmniejszać. Ponadto regulacja w górę miR-379 uratowała fenotyp indukowany przez nadekspresję circHIPK3.
• CircHIPK3 może promować proliferację komórek poprzez szlak circHIPK3/miR-379 w komórkach NCI-H1299 i NCI-H2170 i może być potencjalnym biomarkerem guza dla NSCLC.

Daucosterol promuje proliferację nerwowych komórek macierzystych.

Nerwowe komórki macierzyste (NSC) są komórkami samoregenerującymi się, ale ich zdolność do regeneracji jest ograniczona. Niniejsze badanie przeprowadzono w celu zbadania wpływu daukosterolu (steroliny) na promocję proliferacji NSC i określenia odpowiedniego mechanizmu molekularnego.

Wyniki testu cell counting  kit -8 (CCK-8) wykazały, że daukosterol istotnie zwiększał ilość żywych komórek, a skuteczność daukosterolu była zbliżona do podstawowego czynnika wzrostu fibroblastów (bFGF) i naskórkowego czynnika wzrostu (EGF).

Wykrycie metodą cytometrii przepływowej NSC znakowanych CFSE (CFSE, ester sukcynoimidylowy dioctanu karboksyfluoresceiny) wykazało, że wskaźnik Div ​​(lub średnia liczba podziałów komórek) i % podzielonych (lub odsetek komórek, które podzieliły się przynajmniej raz) komórek uległy zwiększeniu , wskazując, że daukosterol zwiększał odsetek NSC powracających do cyklu komórkowego.

Analiza mikromacierzy mRNA wykazała, że ​​333 geny, które są głównie zaangażowane w mitotyczny cykl komórkowy, uległy regulacji w górę. Dla kontrastu, 627 genów, które są w większości zaangażowane w różnicowanie, uległo obniżeniu.

W szczególności insulinopodobny czynnik wzrostu I ( IGF1 ) uznano za ważny gen regulatorowy, który funkcjonalnie promował proliferację NSC, a zwiększoną ekspresję  białka IGF1  potwierdzono  testem ELISA . Ponadto wzrosła fosforylacja AKT, co wskazuje, że aktywność daukosterolu zwiększająca proliferację może być zaangażowana w  szlak IGF1 -AKT.

Nasze badanie dostarczyło informacji na temat daukosterolu jako wydajnej i niedrogiej alternatywy dla czynnika wzrostu, która może być wykorzystywana w medycynie klinicznej i zastosowaniach badawczych.

Wpływ i jego mechanizm IGF-1R na syntezę kwasu hialuronowego w orbitalnych fibroblastach oftalmopatii związanej z tarczycą.